Au programme (13 mai 2026 | UQAM Montréal)
- Observation de cellules au microscope suite prélèvement d’un échantillon buccal au microscope
- Observation de cellules végétales au microscope (oignon rouge)
- Extraction d’ADN contenu dans le noyau d’une cellule
Les labos de l’UQAM sont toujours passionnants. Je remet mes notes des étapes d’extraction pour le 3ème labo : Extraction d’ADN contenu dans le noyau d’une cellule !
① Collecte par rinçage buccal de 30 secondes, on récupère dans un petit verre et transfert 3 ml dans un tube de 15 ml pendant, le liquide devient légèrement trouble pour indiquer la présence de cellules.
② Transfert dans un microtube Eppendorf . Le liquide buccal est transféré à l’aide d’une micropipette dans un tube Eppendorf de 1,5 ml
③ Ajout du tampon de lyse – avec une Pipette Pasteur on ajoute 2 ml de tampon de lyse (liquide bleu clair) au tube Eppendorf (total de 5m) ; le Tampon de lyse brise les membranes cellulaires.
④ Ajout de 30 µl d Protéinase K avec une micropipette de laboratoire simple à haute précision automatique (liquide symbolysé en corail/rose sur le diagramme) dans le tube. Illustration de la Protéinase K représentée comme une paire de ciseaux coupant une chaîne de perles (acides aminés / protéines) — identique au slide projeté visible dans les photos. Légende : Dégrade les protéines associées à l’ADN — site de clivage.
⑤ Incubation au bain sec (bloc métallique chauffant, avec thermomètre intégré), réglé à 55 °C pendant 10 minutes pour activation enzymatique.
⑥ Précipitation à l’éthanol froid — Ajout d’éthanol 95% froid (conservé dans la glace) (tubes à bouchon rouge sur glace, étiquette jaune « Éthanol 95% ») dans le tube Eppendorf. Règle standard : 2 à 2,5× le volume de l’échantillon donc environ 10ml ce qui fait un total du tube complet de 15ml
⑦ Le tube est retourné doucement 5 fois. Laisser reposer 5 minutes à température ambiante pour obetnir précipitation de l’ADN.
On peut finalement faire la visualisation de l’ADN montrant un précipité blanc filamenteux visible à l’œil nu au fond du tube
